BUENOS AIRES

VISTO el Expediente Nº1-2002-5721/97-2 del Registro del MINISTERIO DE SALUD Y ACCIÓN SOCIAL; y

Que las mencionadas normas han sido elaboradas a fin de proporcionar al cuerpo médico un mayor conocimiento y mejor información sobre el diagnóstico etiol´gico de las enfermedades, para su mejor tratamiento y conocimiento epidemiológico que posibilite la prevención de dichas patologías.

Por ello,

RESOLUCIÓN Nº538

Dr. Alberto Mazza

SECRETARIA DE PROGRAMAS DE SALUD

Dr. Victor Martínez

SUBSECRETARIA DE ATENCION COMUNITARIA

Dra. Dora V. de Saráchaga

Dr. Carlos M. Juliá

DIRECCION de EPIDEMIOLOGIA

Dr. Roberto Chuit

DEPARTAMENTO RED de LABORATORIOS de SALUD

Dra. Isabel Miceli

9 de agosto de 1996

INTRODUCCION.............................................. 1

INSTRUCTIVO PARA ENVIO DE MATERIALES.................... 2-4

MUESTRAS BIOLOGICAS......................................................... 5-7

LABORATORIOS...................................................................... 8-14

ENVASE TIPO PARA ENVIO DE MUESTRAS........................ 15

FICHA PARA ENVIO DE MUESTRAS.................................. 16-17

REFERENCIAS.......................................................................... 19

PROFESIONALES PARTICIPANTES...................................... 20

Estimado colega.

Con la coordinación de este departamento y la colaboración técnica del departamento de Enfermedades Agudas Prevalentes; el Departamento de Virus del Instituto Nacional de Microbiología "Dr. Carlos Malbrán", el Instituto Nacional de Enfermedades Virales Humanas "Dr. Julio Maistegui" y especialistas invitados, se ha confeccionado esta guía que consta de:

1- instructivo para la toma, conservación y derivación de muestras para estudio virológico.

2- cuadro con los virus que más frecuentemente causan los síndromes clínicos o afectan los distintos sistemas o aparatos y los materiales más apropiados para su estudio y diagnóstico.

3- lista de laboratorios de derivación. Esta lista, es inicial y dinámica por lo que solicitamos tanto a los laboratorios públicos como privados que realicen estudios virológicos y no estén en este listado, se comuniquen con la Dirección de Epidemiología: FAX 01-383-0105, e-mail Redlab@epici.sld.ar, para incluirlos en un anexo.

4- ficha única de derivación de muestras, que creemos es útil para el envío de material para diagnóstico viral, bacteriano, micótico y parasitario.

Esperamos su opinión y aportes, y muy especialmente su difusión al nivel operativo, para comenzar a hablar todos un mismo idioma.

Muchas gracias a todos los que colaboraron, colaboran y a quienes lo hagan en el futuro, para mejorar el diagnóstico etiológico de las enfermedades, para el mejor tratamiento individual y para el conocimiento epidemiológico que posibilita la prevención, que es la medida en salud, de mayor impacto y menor costo.

Es importante remarcar que el material que se remite para estudio es potencialmente infectante, por lo que se deberá cumplir extrictamente con las normas de bioseguridad para su toma, conservación y envío.

Departamento Red de Laboratorios de Salud

Dirección de Epidemiología

INSTRUCTIVO PARA EL ENVIO DE MATERIALES

- Las muestras deben ser tomadas y transportadas, respetando estrictamente las normas de bioseguridad, evitando que el exterior de los recipientes esté contaminado con el material biológico. Los tubos deben ser de plástico con tapa a rosca y su cierre hermético.

- Cada recipiente con material biológico deberá tener un rótulo indicando apellido y nombre del paciente, tipo de ¨ material y fecha de obtención. Ver figura en página 11

- Una vez obtenida la muestra, será inmediatamente remitida al laboratorio, en recipiente de telgopor con refrigerante (protegiendo el tubo para que no se humedezca), no congelado, a menos que se indique específicamente.

- Deberá asegurarse su recepción por el laboratorio, dentro de las 24 horas de obtenida (avisar previamente su envío).

1) HISOPADO NASAL, FARINGEO Y OTROS: Tomar el palillo del hisopo en forma estéril (con guantes), humedecerlo con el medio de transporte, realizar el hisopado e introducirlo nuevamente en el tubo de plástico, sumergido en el medio de transporte, hasta que permita el cierre hermético, con tapa a rosca.

Para papiloma virus, el material de hisopado o raspado cervicovaginal debe sumergirse en PBS 0.01 M y pH 7.2 estéril y enviarlo al laboratorio refrigerado dentro de las 72hs de obtenido o enviar extendido citológico sobre portaobjeto, fijado en formol bufferado(**)

2) ASPIRADO NASOFARINGEO: El método de elección es la aspiración con bomba de vacío. Utilizar una sonda nasogástrica conectada a una tubuladura para suero Nº 1 y ésta a un tubo colector estéril. Introducir la sonda nasogástrica por las fosas nasales hasta la pared posterior de la faringe. Luego, con la misma sonda, aspirar 2 ó 3 ml de medio de transporte para virus, si se desea realizar también aislamiento viral. Para efectuar únicamente diagnóstico rápido, enviar en 2 ó 3 ml de PBS (*) 0.01 M pH 7.2 estéril (en su defecto utilizar solución fisiológica estéril). Mantener y transportar las muestras, refrigeradas (no congeladas).

(*) Solución de fosfato, buffer, sulfato.

3) MATERIA FECAL: Una o dos cucharadas, en frasco de boca ancha con tapa a rosca, bien limpio. En caso de ser imposible la recolección de materia fecal, enviar un hisopado rectal (tomado con guantes), sumergido en el medio de transporte.

4) LCR, ORINA, SUERO, LIQUIDO PLEURAL, PERICARDICO, U OTROS LIQUIDOS ORGANICOS: Enviar, en tubo de plástico estéril, con tapa a rosca. NO DILUIR CON MEDIOS DE TRANSPORTE.

5) VESICULAS: Ruptura con aguja estéril y absorción del exudado del área desnuda con hisopo seco (tomar el hisopo con guantes), raspando bien la base de la lesión. Introducir el hisopo en el tubo de plástico, sumergirlo en el medio de transporte hasta que permita el cierre hermético, con tapa a rosca.

6) MATERIAL DE BIOPSIA O NECROPSIA: Colocar en medio de transporte para virus. En su defecto en solución fisiológica estéril. NO COLOCAR EN FORMOL, a menos que esté indicado expresamente.

Para estudio inmunohistoquímico de hantavirus, enviar trozo de tejido en formol bufferado (**).

Para papilomavirus enviar cortes seriados de 5µm montados en portaobjetos, obtenidos de taco de biopsia fijada y embebida en parafina. En su defecto enviar los trozos de tejido en formol bufferado.

7) TECNICAS SEROLOGICAS: Enviar 2 muestras de 2 a 3 ml de suero en un tubo de plástico con tapa a rosca y cierre hermético. La 1ª dentro de la primera semana de enfermedad y la 2ª a las 2 ó 3 semanas de la primera. Enviar preferentemente congelado o en su defecto refrigerado. Para determinación de IgM específica, puede enviarse una sola muestra de la etapa aguda, con excepción de sarampión y rubeóla para las que son necesarias 2 muestras, la primera al momento de la consulta y la segunda a los 10 - 15 días de la primera.

8) DETERMINACION DE ANTIGENO O AISLAMIENTO VIRAL: Enviar 10 ml de sangre heparinizada recogida en tubo de plástico estéril.

Para Hantavirus, conservar a -70ºC y enviar congelado. Para realizar PCR (detección de genoma), debe usarse EDTA en lugar de heparina, o enviar el coágulo luego de separar el sero.

-Formol puro (40%) -10 ml Fosfato monosódico 4,0 g.

-Fosfato Disódico 6,4 g. –Agua destilada 900 ml.

-ph: 7.4

9) DETECCION DE GENOMA VIRAL: Para realizar PCR , debe usarse EDTA(**) en lugar de heparina, o enviar el coágulo luego de separar el suero.

- Formol puro (40%) 10ml - Fosfato monosódico 4,0g

- Fosfato disódico 6,4g - Agua destilada 900ml

- pH: 7.4

(***) EDTA: 0.35 M Ph 7.2, emplear 70ml por ml de sangre

DIAGNOSTICO VIROLOGICO

(*) En negrita las muestras más útiles para cada estudio

(*) En negrita las muestras más útiles para cada estudio

(*) En negrita las muestras más útiles para cada estudio

(**) Cualquiera sea el sindrome clínico, cuando exista compromiso neurológico enviar LCR para estudio.

ANF: aspirado nasofaríngeo, H: hisopado, HF: hisopado faríngeo,

HNyF: hisopado nasal y faríngeo, HO: hisopado ocular, HV: hisopado vesicular, LBA: Lavado broncoalveolar, LCR: líquido cefalorraquídeo, LP: líquido pericárdico, MF: materia fecal, ($) fijado en formol bufferado, ($$)cortes del taco de biopsia, fijada y parafinada.

En los cuadros precedentes se pueden observar las muestras biológicas útiles para el aislamiento viral, de acuerdo a los síndromes clínico-infecciosos que pueden producir.

15

* Es copia de WHO: Laboratory Biosafety Manual. 2ª Edición 1993

Con # están señalados los estudios que se realizan en el Departamento de Virología del Instituto Nacional de Microbiología " Dr. Carlos Malbrán" ## Estudios a realizar sólo en caso de epidemia

Dra. Virginia Alonio Teléfono: 01-303-1806/11 Int. 215/253 Fax: 01-303-1433/2382

- Virosis Respiratorias: Dra. Vilma Savy

- Neurovirosis: Dra. Cecilia Freire

- Virosis Congénitos y Perinatales: Dra. Angélica Distéfano

- Hepatitis y Gastroenteritis Virales: Dr. Jorge Gonzalez;

- Gastroenteritis Virales: Dr. Jorge Gómez

- Virus wazzu Oncogénicos: Dra. Alejandra Picconi

- Cultivo de Tejidos: Dra. Mónica Tous

- Microscopía Electrónica: Dr. Juan Pablo Bozzini

- Biología Molecular: Dra. María Fernandez Cobo

Con @ están señalados los estudios que se realizan en el Instituto Nacional de Virología "Dr. Julio Maistegui": Dra. Delia Enría. Teléfono: 0477-29712/14 Fax: 0477-33045

Dicho laboratorio realiza también estudios para HIV, CMV, HVA, HVB, HVC y puede realizar estudios para diagnóstico de rubéola y sarampión.

HIV: Centro Nacional de Referencia.

Departamento de Microbiología. Facultad de Medicina UBA:

Dr. Osvaldo Libonatti. TELEFAX : 961-8124

- Hospital de Clínicas "José de San Martín". Facultad de

Medicina. UBA: Dr. Jorge Rey. TELEFAX: (01) 961-8160

- Hospital Argerich: Dras. Mirta Kina y Silvia Sookoian

FAX: (01) 362-2645/2621

- Hospital Sardá: Dres. Fabián Olivetto y Marialda Sarubbi

FAX: 01-943-4892-1248

- Instituto de Hemoterapia de la Provincia de Buenos Aires:

Dr. Alejandro Chiera.TELEFAX: 021-534012 FAX:534097

- Hospital Sor María Ludovica: Dres. Nora Pizarro y Jorge

Donatone. Teléfono: 021-535901/09 FAX: 021-535930

- Hospital Posadas: Dres. Mario Eposto y Margarita Ramonet.

Teléfono: 01-658-3001/20 FAX: 01-654-0817

- Hospital Belgrano. Partido de San Martín: Dr. José

Curciarello. Teléfono: 01-755-2228/3380/9813 FAX: 01-755-8450

San Miguel de Tucumán, Tucumán.

- Hospital Padilla: Dr. Francisco Pallazo.

FAX: 081-225139

Resistencia, Chaco.

- Hospital Perrando: Dres. Adrián Sorrentino y Adriana

Fabre. TELEFAX: 0722-24402/22396/2338/32783

Córdoba.

- Laboratorio de Virología de la Provincia de Córdoba:

Dr. Osvaldo Elbarcha. TELEFAX: 051-227537/221270

- Hospital San Roque: Dra. Silvia Mengarelli.

Teléfono: 051-230071/6 FAX: 051-220445

Mendoza.

- Hospital Central. Dr. Carlos Espul.

Teléfono: 061-200600 FAX: 061-201514

- Hospital Lagomaggiore: Dr. Carlos Milutin.

Teléfono: 061-259700 FAX: 061-259315

Rosario, Santa Fe.

- Centro de Tecnología en Salud Pública.

Laboratorio de Virología de la Universidad de Rosario:

Dr. Oscar Fay. Teléfono: 041-370765 FAX: 041-262937.

Ver más abajo (*).

- Hospital Centenario. Dr. Fernando Bessone.

Teléfono: 041-388232/391212 FAX: 041-370003

- Maternidad Martín: Dres. Lelio Mangiaterra y Dr. Juan

Nardín. TELEFAX: 041-214853

Bahía Blanca

- Hospital Penna: Dres. Hugo Castro y Susana Gentilucci

Teléfono: 091-813300 FAX: 091-810801

- Hospital Zonal: Dras. Marta Pizarro y Beatriz Ríos.

Teléfono: 099-431474 FAX: 099-424831

- Trelew. Chubut.

Hospital Zonal: Dres. Eduardo Fernandez y Jorge Goyberg.

Teléfono:0965-30574 FAX: 0965-31451

anti-VIH:(EIA); anti-HVC:(HEP C); anti-VIH:WESTERN BLOT;anti-CMV:IgG/gM; anti-HVA:IgM; anti-HVA:Total; anti-HBc:Total; anti-HBc:IgM; anti-HBe; anti-HBs; anti-Rubeola:IgG/IgM; anti- Herpes I:IgG/IgM; anti-Herpes II:IgG/IgM; anti-HTLV I/II; anti- HVC:(LIA III); anti-adenovirus:IgG/IgM; anti-coksakie (screening):IgG/IgM; anti-echo coksakie (screening):IgG/IgM; anti-Influenza A:IgG/IgM; anti-Influenza B:IgG/IgM; anti-Sarampión:IgG/IgM; anti-Parotiditis:IgG/IgM; anti-Virus Respiratorio Sincicial:IgG/IgM; anti Varicella Zozter IgG/IgM.

HBs (HEP B); HBe; HIV; HIV (p24); Influenza A; Influenza B; Virus Respiratorio Sincicial; Varicella-Zoster Virus; Herpes I; Herpes II; Adenovirus; Parainfluenza; Rotavirus; CMV.

HBV-DNA:Slot Blot; HBV-DNA:PCR; HCV-RNA:PCR; CMV:PCR; HIV DNA:PCR; HSV:PCR; HPV: hibridación in situ, PCR.

- Instituto de Virología de la Facultad de Medicina.

Universidad Nacional de Córdoba: Dra. Violeta Knez.

Teléfono: 051-603088/602895 FAX: 051-691610

- Instituto Nacional de Epidemiología "Dr. Juan Jara".

Mar del Plata: Dr. Carlos Fernandez Pascua.

Teléfono: 023-731506 FAX: 023-744123

- Instituto Nacional de Epidemiología " Dr. Emilio Coni".

Santa Fe: Dra. María Latini. Teléfono: 042- 892830

TELEFAX: 042-892827

- Laboratorio de Virología del Hospital Municipal de Niños

"Dr. Ricardo Gutierrez": Dra. Alicia Mistchenko.

TELEFAX: 01-962-6770 / 01-963-7569

- Laboratorio de Virología del CEMIC: Dra. Guadalupe

Carballal. Teléfono: 01-803-0733 FAX: 01-805-3233

- Laboratorio Central. Ministerio de Salud. Santa Fe.

Dr. Carlos Passeggi.Teléfono: 042-892895 FAX: 042-891178

- Laboratorio de Virología. Htal. San Juan de Dios. Ministerio

de Salud. La Plata. Dra. Norma Banfi. Teléfono: 021-575454

FAX: 021-511327

- Servicio de Laboratorio de Serología. Htal. Petrona Cordero. Ministerio de Salud. San Fernando. Dra. Alicia Poretti.

Teléfono: 01-744-44557 FAX: 01-744-4633

- Servicio de Virología. Instituto Nacional de Epidemiología

"Dr. Juan Jara". Mar del Plata. Dr. Carlos Fernández Pascua.

Teléfono: 023-731506 FAX: 023-744123

- Laboratorio de Virología. Htal. Municipal de Niños

"Dr. Ricardo Gutierrez". Dra. Alicia Mistchenko.

TELEFAX: 01- 962-6770/963-7569

- Servicio Virus Respiratorio. Instituto Nacional de Microbiología "Dr. Carlos Malbrán". Dra. Elsa Baumeister.

Teléfono: 01-303-1806/11 FAX: 01-303-1433

Córdoba

- Laboratorio de Virología de la Provincia de Córdoba.

Dr. Osvaldo Elbarcha. TELEFAX: 051-221270

- Instituto de Virología "Dr. J. M. Vanella". Facultad de

Medicina. Universidad Nacinal de Córdoba: Dra. Silvia Nates.

Teléfono: 051-602895/603088

- Banco de Sangre Central. Ministerio de Salud Pública.

Dra. Monserrat de Zanini. TELEFAX: 0783-31200

- Laboratorio Central. Ministerio de Salud.

Dr. Enrique Sosa. Teléfono: 0722-44127 FAX: 0722-29496/23387

Mendoza

- Centro Sanitario "Dr. Emilio Coni": Dr. Héctor Bernabé.

Teléfono: 061-251124 FAX: 061-252882

- Htal. de Pediatria. Dr. Federico Payes.

Teléfono: 0752-36503/21110 FAX: 0752-27536

- Servicio de Laboratorio. Htal. Regional "Castro Rendon". Ministerio de Salud.

Dra. Marta Pizarro.

Teléfono: 099-431474 FAX: 099-424831

- Htal. Artemides Zatti. Dr. Alejandro Marenco.

Teléfono: 0920-22333/22224 FAX: 0920-23780

- Laboratorio Central. Sección Serología e Inmunología.

Htal. Materno Infantil. Ministerio de Salud.

Dra. Cristina Vaira. Teléfono: 087-213954 FAX: 087-220519

- Laboratorio Diagnóstico de Rabia. Sistema Provincial de

Salud. Dra. María López de Caillou. Teléfono: 081-234294

FAX: 081-225790

- Buenos Aires

Zoonosis Urbanas de Avellaneda

Dra. Liliana Abramo Orego. TELEFAX: 01-201-2698/5397

- Chaco

Laboratorio de Diagnóstico Regional para Rabia:

Dr. Carlos Alberto González. Teléfono: 0722-25053

- Córdoba

División Rabia. Departamento Zoonosis. Ministerio de Salud

Pública: Dr. Mateo Velazquez. Teléfono: 051-605893/607023

FAX: 051-608503

- Corrientes

Laboratorio de Investigación de Diagnóstico de Rabia:

Dres. Amaury Miranda y Gabriel Marder Teléfono: 0783-22669

FAX: 0783-25753

- Mendoza

División Zoonosis, Reservorios y Vectores. Ministerio de

Salud: Dres. Rodrigo Calomarre y Arnaldo Castro.

TELEFAX: 061-230440

- Salta

Gerencia de Laboratorios del Servicio Nacional de Sanidad

Animal. (SENASA): Dra. Marcela Micheli Teléfono: 087-215241

- Santa Fe

Laboratorio Central de Salud Pública. Zoonosis:

Dres. Alcides Sensevy y Ubaldo Martín.

Teléfono: 042-892895 FAX: 042-891178

- Tucumán

Instituto Antirrábico. División Zoonosis: Dr. Miguel Angel

Rivas de Neira. Teléfono: 081-234294 TELEFAX: 081-225790

Laboratorio Diagnóstico de Rabia. Sistema Provincial de

Salud. Dra. María López de Caillou. Teléfono: 081-234294

TELEFAX: 081-225790

Se solicita a aquellos laboratorios de salud públicos que realicen estudios virológicos y no estén en este listado, se comuniquen con el Departamento Red de Laboratorios - Dirección de Epidemiología: Teléfono: 01-383-6946

FAX: 01-383-0105.

E-mail: Redlab@epici.sld.ar.

Dra. Isabel Miceli Dr. Roberto Chuit

A/C Dpto. Red de Laboratorios Director de Epidemiología

- Cisterna D: Obtención de Muestras para Estudio Virológico,

en Savy V, Candurra N y col: Manual de Técnicas de Diagnóstico

Virológico Rápido. Sociedad Argentina de Virología. Asociación

Argentina de Microbiología. 1994

- Castagnino C, Carrillo y col: Guía de Diagnóstico Virológico.

Departamento de Microbiología. Facultad de Medicina. UBA. 1995

- Bioseguridad en Cura E, Wendel S y col: Manual de Procedimientos de

Control de Calidad para los Laboratorios de Serología de los

Bancos de Sangre. OPS. 1994

- Carballal G., Oubiña J.: Diagnóstico Virológico en Virología

Médica Ed. El Ateneo 1ª Ed. 1991; 76-98

• WHO: Laboratory Biosafety Manual. Macmillan/Clays. 2ª Edición. 1993

PROVINCIA ______________________________________

(VACUNA RELACIONADA CON EL DIAGNOSTICO CLINICO)

1-ORIGEN DEL MISMO :

6- LABORATORIO RECEPTOR DE LA MUESTRA ____________________________________________

7- CONDICION DE ARRIBO DE LA MUESTRA :

BUENA 1

Lidia ALONIO, Jefa del Departamento de Virología del Instituto Nacional de Microbiología "Dr. Carlos Malbrán".

Elsa BAUMESTER, Servicio de Virosis Respiratorias del Departamento de Virología del Instituto Nacional de Microbiología "Dr. Carlos Malbrán".

Delia ENRIA, Directora del Instituto Nacional de Virosis Humana "Dr. Julio Maiztegui".

Cristina ECHEGOYEN, a/c del Departamento de Inmunizaciones.

Dirección de Epidemiología. MSAS.

María Teresa FRANZE, Centro de Virología Animal CEVAN/CONICET.

Cecilia FREIRE, Jefe del Servicio Neurovirus del Departamento de Virología del Instituto Nacional de Microbiología "Dr. Carlos Malbrán".

Jorge GOMEZ, Servicio Gastroenteritis del Departamento de Virología del Instituto Nacional de Microbiología "Dr. Carlos Malbrán".

Jorge GONZALEZ, Jefe del Servicio Gastroenteritis del Departamento de Virología del Instituto Nacional de Microbiología "Dr. Carlos Malbrán".

Nora LOPEZ, Servicio de Biología Molecular. Departamento de Virologia del Instituto Nacional de Microbiología "Dr. Carlos Malbrán".

Isabel MICELI, a/c del Departamento Red de Laboratorios de Salud. Dirección de Epidemiología. MSAS.

Paula PADULA, Servicio de Biología Molecular. Departamento de Virología del Instituto Nacional de Microbiología "Dr. Carlos Malbrán".

Clara RIVA POSSE, Jefa del Departamento de Enfermedades Agudas

Prevalentes. Dirección de Epidemiología. MSAS.

Vilma SAVY, Jefa del Servicio de Virosis Respiratorio del Departamento de Virología del Instituto Nacional de Microbiología "Dr. Carlos Malbrán".

Cristina WOLFF, Coordinadora Red de Laboratorios de Enfermedades Febríles Exantemáticas (EFE). Departamento Red de Laboratorios de Salud. Dirección de Epidemiología. MSAS.